人CD16+细胞分离试剂盒（正选）
91-01-0013
产品简介
CD16是IgG（FcgammaRIII）可结晶片段的低亲和力受体，大小约50～80kD，由两个胞外Ig样区域组成。CD16有两种形式，分别为CD16a和CD16b，由1号染色体长臂的不同基因编码，CD16a表达在NK细胞、小部分alpha/beta T细胞、大多数gamma/delta T细胞、少量单核细胞亚群、巨噬细胞、肾小球系膜细胞、肥大细胞。但不表达在嗜碱细胞。CD16b表达在中性粒细胞，但不表达在嗜碱粒和嗜酸粒细胞中。本产品能够从新鲜或冻存的外周血单个核细胞中简便快捷的分选出较高纯度的CD16+细胞。能够处理的总细胞量为1×109，为基础和临床研究使用CD16+细胞提供一个有力的工具。
预期用途
适用于从人外周血、浓缩白细胞来源的单个核细胞等单细胞悬液中分选出CD16+细胞。
产品信息
中文名称 | 人CD16+细胞分离试剂盒（正选） |
英文名称 | Human CD16+ cell isolation kit（positive selection） |
货号 | 91-01-0013 |
细胞处理量 | 用于处理1×109个细胞 |
分选方法 | 正选 |
试剂盒组成
成分名称 | 物理性状 | 规格 | 数量 |
CD16生物素化抗体 | 无色透明液体 | 200μL支 | 1支 |
链霉亲和素磁珠 | 棕色混悬液 | 500μL/支 | 1支 |
细胞分选缓冲液 | 无色透明液体 | 500mL/瓶 | 1瓶 |
保存方式
生物素化抗体、链霉亲和素磁珠及细胞分选缓冲液均置于2-8°C保存，有效期为12个月；生产日期，有效期至：见标签。
操作步骤
1、 单个核细胞的提取
分离外周血单个核细胞(推荐美高梅mgm集团4688快速单个核细胞分离管，货号91-01-0002),详细使用方法参见单个核细胞分离管说明书。
2、 CD16+细胞分离详细步骤（正选）
1. 往PBMC中加入适量（推荐每1×108cells使用50mL）预冷的细胞分选缓冲液用以洗涤PBMC，300g离心8min；
2. 弃上清，加入适量预冷的细胞分选缓冲液，将PBMC浓度调整为1×108cells/mL，冰浴或4°C预冷5min；
3. 以20μL生物素化抗体/mL PBMC的比例将生物素化抗体加入PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次或涡旋震荡5S，充分混合后置于4°C孵育15min；
4. 孵育完毕后，加入细胞分选缓冲液，300g离心8min；
5. 弃上清，使用细胞分选缓冲液将PBMC浓度调整为108/mL；
6. 以50μL磁珠/mL PBMC的比例将链霉亲和素磁珠加入到PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次混匀，室温静置孵育10min；
7. 孵育完毕后，加入2.5mL细胞分离缓冲液混匀后使用磁极磁吸3min去掉未被磁吸液体；
8. 重复步骤7一到两次；
9. 将收集细胞加入适量（推荐每1×108cells使用50mL）预冷的细胞分选缓冲液300g离心8min去上清，所得沉淀即为目的细胞即可用于下游分析及应用。
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