CD3ε分选磁珠试剂盒，小鼠(92-01-0112)
92-01-0112
分选原理
首先，用生物素标记CD3ε+细胞。随后，用抗生物素磁珠对细胞进行磁性标记。然后，将细胞悬液加到分选柱上，该柱放置在分选器的磁场中。磁性标记的CD3ε+细胞保留在柱内，未标记的细胞贯穿整个柱子。
产品信息
[组分]
1mLCD3ε-生物素，小鼠:与生物素偶联的小鼠CD3ε单抗(同型:仓鼠IgG1型)。
2mL抗生物素抗体磁珠:与抗生物素单抗偶联的磁珠(同型:小鼠lgG1)。
[规格]
可分选109总细胞数，多达100次分选。
[保存形式]
所有组分均保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存，请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
操作步骤
[1.样本制备]
在处理淋巴器官、非淋巴组织或外周血时，可使用手动方法或组织解离器制备单细胞悬液。
[2.磁性标记]
1.细胞计数。
2.300g，离心10min，去除上清。
3.每 107细胞，用100uL缓冲液重悬。
4.每 107细胞，用10μLCD3ε-生物素混匀。
5.混匀，(2-8)℃冰箱避光孵育10min。
6.每107细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞，300Xg离心机10分钟。完全吸去上清。
7.每 107细胞，用80uL缓冲液重悬。
8.每107细胞，加入20uL抗生物素磁珠。
9.混合均匀，在冰箱(2-8℃)孵育 15 分钟。
10.(可选)加入染色抗体，例如10μL的抗生物素-PE或抗生物素-APC，避光(2-8℃)孵育5分钟。
11.每107细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞，300Xg离心机10分钟。完全吸去上清。
12.后将多1.25X108细胞重悬在500μL缓冲液中。
[3.手动磁性分选]
使用 LD 分选柱进行细胞分选
1.将分选柱置于相对应的分选器中。
2.用 2mL缓冲液润洗分选柱:
3.将细胞悬液转移至分选柱中。
4.用2mL缓冲液清洗分选柱，结合磁珠的细胞会被吸附到分选柱上，没有结合的细胞会顺着液体流下来。这是未标记的细胞。
5.将分选柱从分选器中取出，并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中，迅速用塞子推下，得到就是目的细胞。
[4.自动磁性分选]
程序的选择取决于分选策略、磁性标记的强度和磁性标记细胞的效率。以下程序是小鼠脾细胞的分选建议:
1.准备好仪器并做好前期准备。
2.放置包含样品的试管，并提供收集标记和未标记细胞的试管。将样品管放置在管架的A排中，将采集管放置在B和C排中。
3.选择以下程序:去除:“Depl05”，收集管架B里的未标记细胞。
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