产品描述
为了从小鼠脾或淋巴结的单个细胞悬液中分离出小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞,在分离过程中不需要离心洗涤步骤,而开发了一种CD4+CD25+调节性T细胞分选试剂盒。
体内和体外研究表明,CD4+CD25+免疫调节性T细胞能够主动抑制针对自体抗原和外来抗原的免疫反应。CD25是IL-2R的a链,也表达在活化的CD8+T细胞、树突状细胞和B细胞上。
该试剂盒包含一组针对CD8、CD11b、CD45R、CD49b、Ter-119的谱系特异性生物素偶联抗体混合物和用于去除非 CD4+T细胞的抗生物素磁珠,以及用于随后阳性选择CD4+CD25+调节性T细胞的CD25-PE 和抗 PE 磁珠。
分选原理
CD4+CD25+调节性T细胞的分选分两步进行。首先,用生物素偶联的抗体混合物作为一级标记试剂,将与磁珠偶联的抗生物素单抗作为二级标记试剂,间接磁性标记非CD4+T细胞。在这两个步骤之间不需要洗涤。同时,细胞用CD25-PE标记,随后通过置于分选器中的分选柱进行分选,将磁性标记的非 CD4+细胞保留在分选柱中,而未标记的CD4+T细胞则流出。
在第二步中,用抗PE 磁珠对CD25-PE标记的细胞进行磁性标记,并通过将其放置在分选器的磁场中的分选柱上分离,从预富集的CD4+细胞中进行正选。磁性标记的CD4+CD25+细胞保留在柱中,而未标记的CD4+CD25-细胞则穿过分选柱并可作为应答T细胞用于抑制测定。
在从磁场中移除该分选柱后,磁性标记的CD4+CD25+细胞可以作为阳性选择的细胞部分被洗脱。为了提高纯度,必须在第二个分选柱分离含有CD4+CD25+细胞的阳性选择细胞部分。
产品信息
[组分]
1mL CD4+CD25+调节性T细胞生物素抗体混合物,小鼠:生物素偶联的抗CD8a、CD11b、CD45R、CD49b 和 Ter-119单抗的混合物。
2mL 抗生物素磁珠:与单克隆抗生物素抗体(同型:小鼠IgG1)偶联的磁珠。
0.2mL CD25-PE,小鼠:与PE 偶联的抗鼠CD25单抗(同型:大鼠 lgM) 。
1mL 抗PE 磁珠:与PE单抗偶联的磁珠(同型:小鼠 IgG1) 。
[规格]
可分选109总细胞数,多达100次分选。
[保存形式]
所有组分储存在含有稳定剂和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
储存条件
2-8℃避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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