树突细胞分选试剂盒II，人（血液样本）(92-01-0281)
92-01-0281
产品描述
树突状细胞是有效的抗原递呈细胞，在启动和引导免疫反应方面发挥着关键作用。在血液中，至少 有三个不同的亚群：浆细胞树突状细胞（PDCs）和两个不同的髓样树突状细胞亚群（MDC1s 和 MDC2s）。这些亚群在表型和功能上存在差异。血液树突状细胞分选试剂盒 II 可同时分离 PDCs、 MDC1s 和 MDC2s 。 所 有 树 突 状 细 胞 亚 群 的 免 疫 磁 标 记 均 使 用 三 种 标 记 物 ： CD304 （BDCA-4/Neuropilin-1）、CD1c（BDCA-1）和 CD141（BDCA-3）。CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1) 的表达严格局限于 PDCs。CD1c (BDCA-1) 在 CD11 high CD123 low 的 MDC1 上表达。CD14（1 BDCA-3） 仅在 MDC2 上高水平表达，MDC2 为 CD11c low 和 CD123-。在血液中，CD1c（BDCA-1）也在 B 细 胞上表达，CD141（BDCA-3）也在单核细胞上低水平表达。因此，在通过磁性标记 CD304 (BDCA-4)、 CD1c (BDCA-1) 和 CD141 (BDCA-3) 正向选择浆细胞和髓样树突状细胞之前，要先清除单核细胞和 B 细胞。 在健康供体中，树突状细胞约占所有 PBMC 的 1%，其中约 0.37% 为 PDC，0.60% 为 MDC1， 0.03% 为 MDC2。
分选原理
血液树突状细胞分选试剂盒 II 用于从外周血单个核细胞（PBMC）中分离树突状细胞。树突状细胞 的分选分两步进行。首先，用非 DC 去除混合物对 PBMC 进行标记，混合物由 CD14 和 CD19 磁 珠组成，用于对单核细胞和 B 细胞进行磁性标记；CD1c (BDCA-1) 生物素结合抗体用于对 CD1c (BDCA-1)+ 髓样树突状细胞进行生物素标记。随后将细胞放在分选柱上进行磁性分离，磁性标记的 单核细胞和 B 细胞被清除。然后将含有预富集树突状细胞的流过部分与 DC 富集混合物一起孵育， 其中包括 CD304（BDCA-4/Neuropilin-1）和 CD141（BDCA-3）磁珠，用于磁性标记浆细胞树突状细胞和 CD141（BDCA-3）+ 髓样树突状细胞；以及抗生物素磁珠，用于磁性标记上一步中生物素标 记的 CD1c（BDCA-1）+ 髓样树突状细胞。在随后的磁性分离过程中，磁性标记的树突状细胞被保 留在分选柱上，并在分选柱脱离磁场后被洗脱。为了达到高纯度，含有富集树突状细胞的正选细胞 部分会在第二个分选柱上分离。
产品信息
[组分]
2 mL 非 DC 去除混合物，人： 由抗人 CD1c (BDCA-1)（克隆：AD5-8E7；同种型：小鼠 IgG2a） 的单克隆生物素抗体，以及抗人 CD14（同种型：小鼠 IgG2a）和人 CD19（同种型：小鼠 IgG1）的 单克隆抗体结合的磁珠组成的混合物。
2 mL 人 DC 富集混合物：与针对人 CD304 (BDCA-4/神经纤蛋白-1)（同种型：小鼠 IgG1）、人 CD141 (BDCA-3)（同种型：小鼠 IgG1）和生物素（同种型：小鼠 IgG1）的单克隆抗体偶联的磁珠。
2 mL FcR 阻断试剂：人 IgG。
[规格]
可分选 2×109 个细胞总量，多达 20 次分离。
[保存形式]
所有组分储存在含有稳定剂和 0.05% 叠氮化钠的缓冲液中。
储存条件
2 - 8 °C 避光保存，请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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