产品描述
免疫耐受体现了免疫系统下调免疫反应的能力。通常认为B细胞通过产生特异性抗体并帮助诱导佳的CD4+T细胞激活来发挥积极调节的免疫反应。然而,B细胞和特定B细胞亚群也可以负向调节小鼠的免疫反应,从而验证了调节性B细胞的存在。调节功能是通过细胞因子IL-10 的产生直接完成的。自身免疫和炎症部分由这些调节性B细胞控制。调节性B细胞分选试剂盒的设计用于分选、检测和分析分泌IL-10 的活鼠B细胞。
分选原理
调节B细胞的分选分三步进行。首先,通过去除非B细胞预富集B细胞。其次,用LPS,PMA和离子霉素等在培养物中刺激预富集的B细胞5小时,以诱导IL-10分泌。第三,通过使用细胞因子分泌测定技术特异性分离产生IL-10的活细胞。
因此,IL-10 特异性捕获试剂附着在细胞表面。这些细胞在37℃下短时间内孵育,以允许细胞因子的分泌。分泌的IL-10与细胞因子分泌细胞上的调节性B细胞捕获试剂结合。随后,用第二种 IL-10 特异性抗体标记这些细胞,该抗体是与PE 偶联的调节性B细胞检测抗体,用于通过流式细胞术进行高灵敏检测。然后可以用抗PE 磁珠磁性标记分泌IL-10的细胞,并在放置在分选器磁场中的分选柱上进行浓缩。磁性标记的部分被保留在柱内。未标记的细胞贯穿其中。经分离后,磁性标记的分泌IL-10 的细胞可被洗脱为阳性选择的细胞部分。这些细胞现在可以用于细胞培养或分析。由于对活细胞进行了分析,因此可以通过排除死细胞来小化非特异性结合。这提供了高的分析灵敏度。
产品信息
[组分]
2mL 调节性B细胞生物素抗体混合物,小鼠:抗CD4、CD11c、CD49b、CD90.2、Gr-1 和 Ter119的单克隆抗小鼠抗体偶联生物素混合物。
2X2mL 抗生物素磁珠:与单克隆生物素抗体(同种型:小鼠IgG1)偶联的磁珠。
1mL 调节性B细胞捕获试剂,小鼠:抗IL-10单克隆抗体(大鼠IgG2b)与CD45特异性单克隆抗体(大鼠 lgG2b) 偶联。
1mL 调节性B细胞检测抗体(PE):与PE 偶联的IL-10 单克隆抗体(大鼠IgG1)。
2mL 抗PE 磁珠:与单克隆抗PE抗体(同种型:小鼠IgG1)偶联的磁珠。
[规格]
可分选2X109个细胞总量,多达20次分选。
[保存形式]
所有组分均储存在含有稳定剂和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
储存条件
2-8℃避光保存,请勿冻存。有效期见试剂外标签。
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