Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽（远红）
91-07-0004
产品描述
本品为 Alexa Fluor 647 标记的鬼笔环肽， 可发出高亮度、 稳定的远红外荧光， 染色反应特异性强，对比性高， 适合用作 F-actin 的定性和定量检测。 与 Actin 抗体比较， Alexa Fluor 647 鬼笔环肽具有如下优点： (1)与 actin 亚单位一比一结合， 并且不与 G-actin 结合， 具有比 Actin 抗体更好的染色效果。(2)且本品的结合没有物种差异性， 适用性广泛。 (3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略， 因而图像的反差较好。 (4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容， 包括荧光蛋白、 纳米晶体和其他 Alexa Fluor偶联物（包含 Alexa Fluor 偶联二抗)。 (5)经本品结合后的 F-actin 仍能维持 actin 自身具有的许多生物学特性。
Ex(nm) ： 650
Em(nm) ： 665
分子量： 约 2200
溶剂： DMSO
产品信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Alexa fluor 647 标记鬼笔环肽（远红） | 91-07-0004 | 300 T |
运输与保存
蓝冰运输。 -20℃避光干燥保存， 有效期 12 个月。 【注】 ： 避免反复冻融。
使用方法
1. 准备 1000× DMSO Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽存储液
用 30 μL DMSO 溶解粉末状 Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽， 可按需分装并于 -20℃ 避光干燥保存， 分装保存， 避免反复冻融。
2. 准备 1× Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽工作液
吸取 1 μL 1000×Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽存储液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 缓冲液中即可得到1×工作液。
3. 细胞染色步骤
（1） 细胞培养过夜或更长， 使其密度达到 50~60% 汇合度。
（2） 吸掉培养液， 37℃ 预热的 1×PBS（pH 7.4） 清洗细胞 2 次。
（3） 使用含有 3-4% 甲醛的 PBS 溶液进行细胞固定， 室温固定 10~30 min。
（4） 室温条件下， 用 PBS 清洗固定好的细胞 2~3 次， 每次 10 min。
（5） （可选） ： 室温条件下， 用溶于 PBS 的 0.1% Triton X-100 溶液透化处理 3~5 min， 从而增加其通透性。
（6） 室温条件下， 用 PBS 清洗细胞 2~3 次， 每次 10 min。
（7） 每孔加入 Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽工作液 100 μL /孔（96 孔板） ， 室温避光染色 20~90 min，夏季时间相对短些。
（8） 用 PBS 清洗细胞 3 次， 每次 5 min， 去除掉多余的 Alexa Fluor 647 标记鬼笔环肽。
（9） （可选） ： 加入足量的即用型 DAP I 溶液对细胞核进行复染， 如： 100 μL /孔（96 孔板） ， 室温 3~5min。 用 PBS 清洗细胞 2 次， 每次 5 min。
（10） 于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察， 选择 Alexa Fluor 647 激发/发射滤片（Ex/Em=650/665nm） 和/或 DAP I 激发/发射滤片（Ex/Em=364/454nm） 。
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