检测原理
使用干扰素-y分泌检测试剂盒从全血、外周血单个核细胞(PBMC)或其他含有单细胞制剂的白细胞中分析和分离抗原特异性T细胞。用多克隆刺激物或特定的多肽、蛋白质或其他蛋白质抗原制剂,例如来自白色念珠菌的多克隆刺激物或其他蛋白质抗原制剂,短时间内对细胞进行再刺激。随后,将干扰素-y特异性捕捉剂附着到所有白细胞的细胞表面。然后将这些细胞在37℃下培养一小段时间,以允许细胞因子的分泌。分泌的干扰素-y结合于阳性分泌细胞上的干扰素-y捕捉剂。随后用第二种干扰素-y特异性抗体:干扰素-y检测抗体与R-藻红蛋白(PE)偶联,标记这些细胞,用于流式细胞仪的灵敏检测。
分泌干扰素-y的细胞可以用超纯的抗PE磁珠进行磁性标记,并在分选柱上进行浓缩。磁性标记的细胞保留在分选柱中,而未标记的细胞穿过。在柱从磁场中移除后,磁性标记的细胞可以被洗脱为阳性选择的细胞部分,富含分泌细胞因子的细胞。这些细胞现在可以用于细胞培养或分析。由于对活细胞进行了分析,因此可以通过排除死细胞来小化非特异性背景。这提高了的分析灵敏度。
产品信息
[组分]
1 mL IFN-y Catch Reagent:抗IFN-y单克隆抗体(同种型:小鼠IgG1)与细胞表面特异
性单克隆抗体(同种型:小鼠IgG2a)偶联。
1mL IFN-y检测抗体:与PE(R-藻红蛋白偶联的抗IFN-y单克隆抗体(同种型:小鼠 IgG1)。
1mL 抗 PE 磁珠超纯级别:磁珠与鼠抗PE单抗(同型:小鼠IgG1)偶联。
[规格]
50次检测,总计107细胞数。
[保存形式]
所有组分均保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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