分享 | 流式分选 VS 磁性分选，你pick哪一个？
日期：2024-01-29 阅读：
细胞分选的常见方法
细胞分选对于免疫学研究、干细胞研究、细胞治疗、肿瘤学研究等多种研究领域而言，都是绕不开的一个实验步骤，只有将具备特定属性的细胞从多细胞样品中分离出来达到一定的纯度，才能够进行后续的分析处理。
广义而言，细胞分选分为两大类常用方法：一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法，另一类是基于免疫识别特性的方法。不过前者分离所得到的细胞纯度较低，特异性较差，表面标志不明确，更严格来说应该算作细胞分离。基于免疫识别特性的方法则包括荧光激活细胞分选方法（Fluorescence-activated cell sorting，FACS）和磁性激活细胞分选法（Magnetic-activated cell separation，MACS）。
流式分选和磁性分选的基本原理
FACS得益于流式细胞术的兴起而诞生，其基本原理是，当含有单个细胞的液滴通过激光束时，其携带的各种荧光素、荧光染料及其物理生物学特性使得该细胞的散射光信号出现差异，根据信号差异液滴被赋予电荷，从而在经过高压静电场时路径发生偏转，落入不同的收集器中，从而完成目的细胞的分选。
流式分选原理示意图
MACS的基本原理则是，通过结合有特定抗体的免疫磁珠与具有相应抗原的细胞结合，为部分细胞赋予了磁性，当样品缓慢流经磁场时，这部分细胞就会滞留在磁铁上，而无该种抗原的细胞则不具备磁性，不在磁场中停留，从而实现目的细胞的分离纯化。
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磁性分选原理示意图
流式分选和磁性分选的优劣PK
FACS和MACS自诞生以来，都得到了广泛的应用。然而，在不同的实验要求下，FACS和MACS各有所长，应根据实验目的选择更适合的方法。那么，FACS和MACS各有什么优缺点呢？
首先是成本的差异。流式细胞仪的设备价格不菲，运维和用人成本也较高。由于对运行环境的要求较为苛刻，需要设立单独的房间，由专人操作，且由于流式细胞仪操作复杂，需要专业的操作人员；关键元件价格昂贵，一旦损坏，维修替换将会是一笔高昂的开支。磁性分选设备的价格则一般只有流式细胞仪的几分之一，对运行的环境要求不高，一般实验室都可进行，且极易上手，对操作人员的技术要求不高。
其次是对细胞的影响。由于在流式处理过程中 ，细胞需要经过高速流动的步骤，因此FACS对细胞刺激较大，因此对分选出的细胞活性有较大影响，不利于后续的操作。磁性分选，尤其是采用纳米磁珠时，对细胞的影响则可以忽略不计。
在分选效率上，由于流式分选需要保证细胞是单个通过激光器，样本的细胞浓度不能过高，否则细胞容易黏连，因此分选速度约在10E4个细胞/秒级别，而磁性分选则可以达到10E7个细胞/秒级别。此外，对于单次处理样本的体积，磁性分选也远高于流式分选。
不过，在功能上，流式细胞仪因还带有分析功能，要胜过磁性分选设备一筹。在细胞分选纯度上，流式细胞仪可以达到更高的纯度且可同时进行多参数分选，但磁性分选同样可以通过多次分选的方式提高目的细胞纯度以及实现多marker的分选。不过，当需要根据胞内指标对细胞进行分选时，磁性分选就无法实现了。
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那么流式分选VS磁性分选，你pick哪一个呢？
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