新品 | 小鼠CD31分选磁珠
日期:2024-06-24 阅读:
产品描述
CD31抗体与细胞表面蛋白CD31反应。鼠CD31抗原也称为PECAM-1。CD31是单通I型膜蛋白,含有6个Ig样C2型结构域,并作为细胞粘附分子起作用。它存在于成熟的内皮细胞以及大多数白细胞亚型和血小板上,其中表达水平可以变化。除了其在细胞粘附中的功能外,在大多数炎症条件下,蛋白质为白细胞跨内皮迁移(TEM)所必需。
分选原理
CD31抗体与细胞表面蛋白CD31反应。鼠CD31抗原也称为PECAM-1。CD31是单通I型膜蛋白,含有6个Ig样C2型结构域,并作为细胞粘附分子起作用。它存在于成熟的内皮细胞以及大多数白细胞亚型和血小板上,其中表达水平可以变化。除了其在细胞粘附中的功能外,在大多数炎症条件下,蛋白质为白细胞跨内皮迁移(TEM)所必需。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。将缓冲液置于2-8°C。使用前对缓冲液进行脱气处理,因为空气气泡可能会堵塞分选柱。始终使用新鲜制备的缓冲液。
●分选柱和分选器:CD31阳性细胞可以用xM、xL分选柱富集。强烈表达CD31抗原的细胞也可以用xM、xL分选柱去除。
●(可选)荧光偶联的CD31抗体用于流式分析。
●(可选)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死细胞。
●(可选)死细胞清除试剂盒用于死细胞的清除。
●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一、样本准备
在处理淋巴器官、非淋巴组织或外周血时,使用手动方法或组织解离器制备单细胞悬液。
当处理原代组织时,使用手动方法或组织解离器制备单细胞悬液。
二、磁珠标记
1.细胞计数。
2.300×g离心10分钟。去除上清。
3.每107个细胞总量使用90μL缓冲液重悬。
4.每107个细胞总量添加10μL CD31磁珠。
5.混匀,2−8°C孵育15分钟。
6.(可选)添加染色抗体,例如:10μL CD31-PE2−8°C避光孵育5分钟。
7.每107个细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞,300×g离心10分钟,去上清。
8.用500μL缓冲液重悬多108个细胞。
三、细胞分选
1.细胞计数。
2.300×g离心10分钟。去除上清。
3.每107个细胞总量使用90μL缓冲液重悬。
4.每107个细胞总量添加10μL CD31磁珠。
5.混匀,2−8°C孵育15分钟。
6.(可选)添加染色抗体,例如:10μL CD31-PE2−8°C避光孵育5分钟。
7.每107个细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞,300×g离心10分钟,去上清。
8.用500μL缓冲液重悬多108个细胞。
储存条件
2-8°C避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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