新品 | 人CD138分选磁珠
日期：2024-07-29 阅读：
产品描述
CD138磁珠可用于从从人外周血单个核细胞(PBMC)、骨髓或淋巴组织中分离浆细胞。CD138，也被称为syndecan-1，在正常和恶性人类浆细胞上表达，通常被用作鉴定它们的通用标记。CD138还表达在内皮细胞、胚胎间充质细胞、血管平滑肌细胞。在小鼠中，CD138表达在浆细胞上，也表达在骨髓中的B细胞前体细胞上。
分选原理
首先，用CD138磁珠对CD138+细胞进行磁性标记。然后，将细胞悬液装入置于分选器磁场的柱中。磁性标记的CD138+细胞被保留在柱中，未标记的细胞贯穿其中。将柱从磁场中移出后，磁性标记的CD138+细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。
如果需要非常高的纯度，在CD138磁珠进行阳性选择之前，我们建议先使用CD20磁珠标记去除CD20+B细胞。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。将缓冲液置于2-8℃。使用前对缓冲液进行脱气处理，因为空气气泡可能会堵塞分选柱。
●分选柱和分离器:CD138阳性细胞可以用xM、xL分选柱富集。强烈表达CD138抗原的细胞也可以用xM、xL分选柱去除。
●(可选)荧光偶联的抗体用于流式分析。
●(可选)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死细胞。
●(可选)死细胞清除试剂盒用于死细胞的清除。
●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一.样本准备
在处理抗凝外周血或白膜层时，应使用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)。
当处理组织或溶血时，使用标准方法制备单细胞悬浮液。
二.磁珠标记
1.细胞计数。
2.300xg离心10分钟。去除上清。
3.每2X107个细胞总量使用80μL缓冲液重悬。
4.每2X107个细胞总量添加20μL CD138磁珠。
5.充分混匀，2-8℃孵育15分钟。
6.(可选)添加染色抗体，例如:10μL CD138-PE 2-8℃避光孵育5分钟.
7.每 2X107个细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞，300xg离心10分钟，去上清。
8. 用 500μL 缓冲液重悬多达108个细胞。
9.进行细胞分选步骤。
三.细胞分选
xM 或xL分选柱进行细胞分选
1.将分选柱置于相对应的分选器中。
2.用适当体积的缓冲液润洗分选柱（xM: 500 μL；xL: 3mL）
3.将细胞悬液转移至分选柱中。
4.结合磁珠的细胞会被吸附到分选柱上，没有结合的细胞会顺着液体流下来。加适量的缓冲液，待液体全部流尽，再加入适量缓冲液，一共洗3次。收集总流出物，这是未标记的细胞。（xM: 3x500 μL；xL:3x3mL）
5.将分选柱从分选器中取出，并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中，迅速用塞子推下，得到的就是目的细胞。（xM:1mL；xL:5mL）
储存条件
在2-8℃条件下避光保存，请勿冻存。有效期见试剂外标签。
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