新品 | 小鼠CD11c分选超纯磁珠
日期：2024-10-14 阅读：
产品描述
CD11c 超纯磁珠用于从淋巴组织和非淋巴组织的单细胞悬液中分离小鼠 CD11c+细胞，如树突状细胞(DC)。与人类不同，CD11c 在小鼠所有已定义的 DC 亚群和某些组织巨噬细胞上都有表达。随着 CD11c磁珠的超纯化，复杂的 DC 分离过程被快速而简单的阳性选择策略所取代。
该产品通过实施我们的重组抗体技术(REAfinity)进行了优化，几乎取消了通过 Fc 受体进行的非特异性结合。
分选原理
首先，用 CD11c 超纯磁珠 对CD11c+ 细胞进行磁性标记。然后，将细胞悬浮液装入分选柱，该分选柱置于分选器的磁场中。磁性标记的CD11c+ 细胞被保留在柱内，未标记的细胞则流出。将分选柱从磁场中移出后，磁性保留的 CD11c+ 细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。
产品信息
使用方法
试剂和设备试剂和仪器要求
● 缓冲液：配制含有 pH 7.2 PBS、0.5% 牛血清白蛋白（BSA）和 2 mM EDTA 的溶液。将缓冲液置于 2-8 °C。使用前对缓冲液进行脱气处理，因为空气气泡可能会堵塞分选柱。
● 分选柱和分选器：CD11c 阳性细胞可以用 xM、xL 分选柱富集。
● (可选) 小鼠脾解离试剂盒，带加热模块的自动组织解离器。
● (可选) 荧光偶联的抗体用于流式分析。
● (可选) PI 或 7-AAD 可以用于流式分析中排除死细胞。
● (可选) 死细胞清除试剂盒用于死细胞的清除。
● (可选) 预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一、样本准备
为了获得小鼠脾脏中 CD11c+ DC 的高回收率和纯度，建议使用小鼠脾解离试剂盒。
当处理组织时，使用自动组织解离器制备单细胞悬浮液。
二、磁珠标记
1.细胞计数。
2.300×g离心10分钟。去除上清。
3.每108个细胞总量使用400μL缓冲液重悬。
4.每108个细胞总量添加100μL CD11c超纯磁珠。
5.混匀，2−8℃下避光孵育10分钟。
6.每108个细胞加入5-10mL缓冲液洗涤细胞，300×g离心10分钟，去上清。
7.用500μL缓冲液重悬多108个细胞。
8.进行细胞分选步骤。
三、细胞分选
xM或xL分选柱进行细胞分选
1.将分选柱置于相对应的分选器中。
2.用适当体积的缓冲液润洗分选柱：（xM:500μL；xL:3mL）
3.将细胞悬液转移至分选柱中。收集流出的未标记细胞。
4.加适量缓冲液洗脱，待液体全部流尽，再加入适量缓冲液，一共洗3次。收集总流出物和第三步流出物混合。（xM:3×500μL；xL:3×3mL）
5.将分选柱从分选器中取出，并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中，迅速用塞子推下，得到就是标记的细胞。（xM:1mL；xL:5mL）
7.（可选）为了提高CD11c+细胞的纯度，洗脱的部分可以在第二个xM或xL柱上富集。用新的分选柱重复步骤1至6中描述的磁分选过程。
储存条件
2-8°C避光保存，请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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