新品 | 无柱式NK(人)细胞分选试剂盒(阴选)
日期:2024-10-21 阅读:
产品描述
本产品主要用于人PBMC的NK细胞分选。可以快速、简便、大量地分离出与磁珠无接触、未标记的NK细胞。通过向PBMC或单细胞悬液中是加入生物素化的混合抗体标记非NK细胞,再用链霉亲和素磁珠结合被标记的非NK细胞;仅需通过手持式永久性磁极吸附的方式,将非NK细胞吸附,从而获取纯净的NK细胞。获得的NK细胞可以直接应用于流式分析、细胞培养等下游实验。
产品信息
使用方法
一、样本准备
人血样本(新鲜样本)处理时,使用密度梯度离心制备PBMC细胞悬液,制备完成的细胞悬液保存在2-8℃中。
二、细胞分离步骤(以1mlPBMC悬液为例)
1、将细胞浓度调整为1×108cells/mL,5mL流式管中加入要分选的细胞悬液(注:细胞加入量多为1×108cells/mL)。
2、向1ml细胞量约为1×108细胞悬液中加入200μL混合抗体,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育5min。
3、抗体孵育完成后,加入200μL链霉亲和素磁珠,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育2min。
4、磁珠孵育完成后,加入适量的分选缓冲液,将流式管中的细胞悬液配至2.5mL体系。
5、将带有细胞悬液的流式管放入磁极中,磁吸附3min(注:液体完全在磁极磁场范围内)。
6、握住磁极将未结合磁珠的目的细胞倾倒入新的离心管中,即为未标记的富集得到的人NK细胞(注:后一滴液体不要倾倒出来,对目的细胞纯度有影响)。
运输与储存
产品运输:2~8℃
产品保存:2~8℃避光储存,不可冷冻,有效期12个月
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