新品 | 小鼠CD4(L3T4)分选磁珠
日期:2024-10-28 阅读:
产品描述
分选原理
首先,用小鼠CD4(L3T4)磁珠对目的细胞进行磁性标记。然后,将细胞悬浮液装载到分选柱上,该分选柱置于分选器的磁场中。磁性标记的目的细胞保留在柱内,未标记的细胞则流出。将分选柱移出磁场后,磁性保留的目的细胞可以作为阳选的细胞部分被洗脱。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2 PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2m MEDTA的溶液。将缓冲液置于2-8°C。使用前对缓冲液进行脱气处理,因为空气气泡可能会堵塞分选柱。
●分选柱和分离器。
●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一、磁珠标记
1.细胞计数。
2.每107个细胞总量使用90μL缓冲液重悬。
3.每107个细胞总量添加10μL CD4(L3T4)磁珠。
4.混匀,2−8°C孵育10分钟。
5.进行细胞分选步骤。
二、细胞分选
xM或xL分选柱进行细胞分选
1.将分选柱置于相对应的分选器中。
2.用适当体积的缓冲液润洗分选柱(xM:500μL;xL:3mL)
3.将细胞悬液转移至分选柱中,收集流穿的未标记的细胞,这部分为CD4阴性细胞。
4.结合磁珠的细胞会被吸附到分选柱上,没有结合的细胞会顺着液体流下来。加适量的缓冲液清洗,收集总流出物和上一步收集的部分混合。(xM:2×500μL;xL:1×3mL)
5.将分选柱从分选器中取出,并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中,迅速用塞子推下,得到就是目的细胞。(xM:1mL;xL:5mL)
储存条件
2-8°C避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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