新品 | 无柱式Pan B(小鼠)细胞分选试剂盒
日期:2024-11-04 阅读:
产品描述
本产品主要用于小鼠Pan B细胞的分选。可以快速、简便、大量地分离出与磁珠无接触、未标记的小鼠Pan B细胞。通过向单细胞悬液中是加入生物素化的混合抗体标记非小鼠Pan B细胞,再用链霉亲和素磁珠结合被标记的非小鼠Pan B细胞;仅需通过手持式永久性磁极吸附的方式,将非小鼠Pan B细胞吸附,从而获取纯净的小鼠Pan B细胞。获得的小鼠Pan B细胞可以直接应用于流式分析、细胞培养等下游实验。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2 PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mM EDTA的溶液。
●分选磁极
操作步骤
一、样本准备
测试的样本为C57小鼠脾脏。脾脏处理时,可使用单细胞悬液制备仪制备成细胞悬液,制备完成的细胞悬液保存在2-8℃中。
二、细胞分离步骤
1.细胞浓度调整为1×108cells/mL,5mL流式管中加入要分选的细胞悬液(注:单管中细胞加入量多为2×108cells/mL)。
2.以100μL抗体/mL细胞的比例将小鼠Pan B混合抗体加入细胞悬液中,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育5min。
3.抗体孵育完成后,以100μL链霉亲和素磁珠/mL细胞的比例将链霉亲和素磁珠加入步骤2的细胞悬液中,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育2min(注:磁珠使用之前请涡旋振荡或吹打混匀)。
4.磁珠孵育完成后,加入适量的分选缓冲液,将流式管中的细胞悬液配至2.5mL体系。
5.将带有细胞悬液的流式管放入磁极中,磁吸附3min(注:液体完全在磁极磁场范围内)。
6.握住磁极将未结合磁珠的目的细胞倾倒入新的离心管中,即为未标记的富集得到的小鼠Pan B细胞(注:后一滴液体不要倾倒出来,对目的细胞纯度有影响)。
储存条件
2-8°C避光保存,请勿冷冻。有效期12个月。
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