新品 | 小鼠CD3+ T细胞分选试剂盒（阴选）
日期：2024-11-25 阅读：
产品描述
小鼠CD3+ T细胞分选试剂盒是通过阴性分选法从小鼠脾脏细胞或其它组织的单细胞悬液中分离出CD3+ T细胞。原理是选用不同的生物素（biotin）标记单克隆抗体对非目标细胞（非CD3+ T细胞）进行标记，而后通过链霉亲和素（streptavidin）标记的磁珠对非目标细胞进行清除，从而达到小鼠CD3+T细胞分选的目的。分选过程需要用到磁力架。
适用范围
本试剂盒适用于从人PBMC中分选出CD3+ T细胞。
产品信息
使用方法
以分选小鼠脾脏CD3+ T细胞为例：
1.制备单细胞悬液：在70μm细胞筛网上研磨脾脏，以预冷的PBS冲洗细胞筛网，收集细胞悬液于50mL离心管中，500g，离心5min。
2.离心结束，弃上清，加入5mL红细胞裂解液（ACK），室温裂解5min，再加入20mL PBS，500g，离心5min。
3.离心完成后，弃上清，将脾细胞重悬于PBS，细胞悬液用70μm细胞筛网过滤后，计数。计数完成后，500g，离心5min。
4.离心完成后，弃上清，将细胞重悬于分选buffer中，调整细胞密度为1×108cells/mL。
5.将100μL细胞悬液（1×107个细胞）加入无菌流式管底部，再加入2μL生物素抗体混合物，混匀后4°C孵育10min。
6.孵育完成后，在流式管中加入20μL清洗过的链霉亲和素磁珠，混匀后4℃孵育10min。
7.孵育完成后，在流式管中加入2.5mL分选buffer，用移液器上下混合吹打5次混匀（避免剧烈振荡或者上下颠倒混匀）。
8.将含有细胞的分选流式管置于磁力架上，静置5min。
9.将细胞悬液轻柔倒入一个无菌离心管中（倾倒过程中流式管不要脱离磁力架），此细胞悬液中即包含纯化的小鼠CD3+T细胞，500g，离心5min。离心后弃上清，收集细胞。
10.根据实验需要洗涤细胞后，将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中，即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。
储存条件
2-8°C避光保存，请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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